双光子荧光探针

双光子荧光探针

关键信息

产品介绍

双光子荧光探针具有双光子性质，是一种具有良好细胞膜通透性的核糖核酸染色剂，在细胞中可以特异性结合RNA并发射出红色荧光信号。在双光子激发下，双光子荧光探针在与RNA结合之前红色荧光微弱，当与RNA结合后红色荧光增强。在荧光显微镜下，经过双光子荧光探针染色的细胞的RNA区域有强烈的红色荧光信号出现。

双光子荧光探针由于具有良好的细胞膜通透性能够用于活细胞中RNA的染色，在固定细胞中，双光子荧光探针能够染色核仁和细胞质中的RNA。此结论经过RNase消化成像实验验证，实验结果如下：1）在没有经过RNase消化的对照组细胞中，双光子荧光探针的红色荧光信号出现在细胞的核仁和细胞质中；2）在经过RNase消化的实验组细胞中，双光子荧光探针的红色荧光信号出现在细胞的细胞核中核仁以外的位置。

使用建议

以双光子荧光探针染色并双光子成像固定SW620细胞中RNA的操作步骤作为一个产品使用示例，用于活细胞成像时省略步骤1即可。

步骤1：移去培养在35 mm成像皿中覆盖率约80%的SW620细胞的培养基，加入1 mL 4%中性甲醛固定液，30分钟后移去并用磷酸盐缓冲溶液（PBS）清洗细胞两遍。

步骤2：向成像皿中加入1 mL干净的PBS或者细胞培养基，然后加入双光子荧光探针5 μL，将细胞放置在37℃培养箱中孵育30分钟。

步骤3：移去含有双光子荧光探针的PBS或者培养基，用PBS清洗细胞两遍，然后加入1 mL干净的PBS或者细胞培养基。

步骤4：将装有完成染色的细胞的35 mm成像皿转移至荧光显微镜下以波长1000 nm的激光作为激发光进行双光子成像。

图一 双光子荧光探针在细胞中的成像特征。

图一 Btpt双光子细胞RNA红色荧光染色剂在细胞中的成像特征。